8.1 - Lymphocytes T mémoires

I) Caractéristiques des lymphocytes T mémoires

  1. Réponses plus sensibles et plus rapide
    👉
    Moments-clés
    • Augmentation du nombre de T cells spécifiques pour Ag
    • Réorganisation du RCT et sa machinerie de signalisation
    • Réorganisation de la chromatine au locus de certains gènes (expression constitutive de ARNm de IFN-gamma, iduction plus rapide de la transcription de certaines gènes codants pour les molécules effectrices, production de la protéine nécessite la stimulation antigènique)
    • Réponse aux signaux innés
    • Présence dans les tissus périphériques non-lymphoides
    • Augmentation du nombre de précurseurs, CD8 T naives va donner naissance à 5000 cellules effectrices au pic de la réponse (jour 7)
    • + on aurait besoin d’une moins grande concentration de pathogènes pour initier une deuxième réponse
    • 90% vont mourir pendant la phase de contraction (reduction du nombre de cells)
    • L’acquisition de mémoires cells - permet une élimination beaucoup plus rapide de l’agent infectieux lors de’une rencontre subséquente

    Évidence expériementale de la réponse plus rapide des Cellules T mémoires

    ¬ Résultats:

    > Les T naives mettent plus de temps pour produire les cytokines qye le T mémoires après stimulation antigénique

    Évidence expérimentale de l’augmentation de la sensibilité des cellules T mémoires envers leur Ag

    ¬ Résultats :

    > Pas dû à un changement d’affinité du RCT des cellules T mémoires elles lient avec la même affinité le complexe peptide-CMH (tétramère), donc une moins grande concentration est necessaire pour atteindre 50% de la réponse (augmentation de l’efficacité de la signalisation du RCT)


    → Ainsi, réponse tellement rapide qu’une ré-infection est difficile de la décerner

    → Tellement efficace que Tcells mémoires peuvent maintenant contôler une infection avec une dose léthale du MO (adapte réponse et efficace pour pas tuer Main hote)

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    Comment lymphocytes T mémoires peuvent-ils être plus sensible envers leur Ag?

    1. Augmentation de l’association de Lck au co-recepteur CD8 (ou CD4)

      Reconnaissance antigénique par les T cells ⇒ co-engagement du CD8/CD4 et du RCT/CD3⇒ tyrosine kinase lck à proximité des chaînes du complexe CD3 ⇒ initiation à la cascade de signalisation

      Dans T cells mémoires : + lck d’associer au co-recepteur ⇒ faciliter à la signalisation via RCT

      - Ainsi, lck associe à la région intracytoplamsique du co-recepteur CD4 et CD8

      1. lck phosphoryle les chaînes du CD3
      1. recrutement de zap-70 au complexe RCT/CD3
      1. ZAP phosphoryle différents adapteurs
      1. adapterus propage signal vers 3 voies de signalisation principales
        • Ras-map kinase
        • PLCg1 (calcineurie, PKC)
        • PI-3K
    1. Organisation en nanogroupe du RCT chez les cellules T mémoires = activation plus rapide et plus forte en comparaison au T cells naifs.

    Comment les Tcells mémoires peuvent-ils répondre plus rapidement?

    Transcription constitutive des gènes codant pour les molécules effectrices (production IFN-gamma - ce qui a pu être mesuré, production de la protéine nécessite une stimulation avec Ag)

    • trancription de certaines gènes codants spour les fonctions effectrices chez les lymphocytes T mémoires( IFN-gamma, perforine)
    • Induction plus rapide de la transcription des gènes codants pour les fonctions effectrices (IL-2, IL-4, IL-5, chémokines)
    • Modification de la structure de la chromatine qui permet de maintenir la transcription ou de l’induire rapidement

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    T cells Mémoires - activés par signaux innées mais n’induisse pas leur prolifération mais peuvent transmettre les signaux necessaire à ce que les T cells naifs prolifèrent

  1. Localisation dans les tissus et les organes lymphoides secondaires
    👉
    Se situent dans les tissus et organes lymphoides secondaires. Ont modifié l’expression de certaines molécules de surface qui participent à l’adhésion et à la chimiotaxie (ceux qui ont accès aux tissus). Sous-populations de T cells mémoires:
    1) Tissus (Trm)
    2) Recircule dans le sang et tissus (Tem)
    3) Circules dans organes lymphoides seocndaires (Tcm)

    1)T cells mémoires centrales (CM) :

    CCR7+ CD62L ⇒ localisation dans les ganglions lymphatiques

    2) Tcells mémoires effectrices(EM) :

    Absence de CD62L+CCR7 - empêche leur entrée dans les ganglions lymphatiques

    Circuler dans le sang, rate, et foie

    3) T cells mémoires résidentes dans tissu non-lymphoides (RM) :

    Absence de CD62L et CCR7 ⇒ ne peuvent entrer dans ganglions lymphatiques

    Expression de différents récepteurs ou chémokine et différentes molécules d’adhèsion vont permettre leur migration et rétention dans les tissus (intestin = CCR9+ alpha4beta7; peau: CCR4, CCR10 et CLA)


    T(RM) donne alarme pour T(CM):

    R primaire (naive) : Production de chémokines par cellules innées dans le tissu infecté. Migration des cellules dentritiques aux ganglions lymphatiques afin d’activer les T naifs. T naifs prolifère + se différencient en effecteurs ⇒ migration aux tissus en réponse aux chémokines.

    R secondaire (mémoire) : T(RM) du tissu infecté ⇒ production rapidement de IFN-gamma ⇒ activation des cellules environnantes (immunes et endothéliales) pour produire des chémokines. Chémokines = recrutement rapide d’un grand nombre de T mémoires qui circulent dans sang au site infection. Les T naifs - pas recrutés au tissus infecté. (Chémokines produites par T(RM) - beaucoup plus fortes que la production par les cellules innées qui réagissent aux pathogènes)

    T(RM) peuvent aussi controler pathogènes en absence du recrutement de T circulants

  1. Durée de vie très longue
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    Moments clés:
    - Réponse à des facteurs de survie (IL_7 et IL-15)
    - Auto-renouvellement:
    tous les 10-14 jours
    acquisition d’un progrmame génique semblable aux cellules souches hématopoiétiques
    IL_15, WNT et Tcells CD4 promouvoit auto-renouvellement
    NaifsEffecteurMémoire
    CostimulationRequise (CD28/B7)--
    Temps nécessiaire pour activation24-48 heures< 1h< 1h
    LocalisationOrganes lymphoides secondairesTissus périphériques, sites inflammées et organes lymphoides secondaires Tissus périphériques, sites inflammées et organes lymphoides secondaires
    Longévité5-7 semaines2-3 joursjusqu’à 50 ans

II) Développement des lymphocytes T mémoires

les Tcells sont deux phses, L,expension ou viennent les effecteurs et l’a contraction pour gener des T mémoires

Comment identifier les T cells efectrices qui vont survivre à la phase de contraction et se diféérencier en lymphocytes T mémoires?

Présence de facteur important pour la différenciation et la survie des lymphocytes T mémoires - IL-7 (CD127)= facteur de survie.

¬ Expérience avec des souris infectées avec LCMV= découverte de deux types de sous-population de T effectrices 90% n’ayant pas IL-7 (CD127) et 10% l’ayant. Pour confirmer le tout, il a été possible de les mettre en évidance en transfectant.

  • Ceux qui possèdent IL-7 exprimées sont différenciés en des T mémoires
  • Existence de deux sous-populations de lymphocytes T effecteurs:

    SLEC: short lived effector cells, Effecteur à demi-vie courte (CD127 low)

    MPEC: memoriy precursor effector cell, effecteur précurseur des cellules T mémoires (CD127 high)

CD4 - requise pour la formation de cellules CD8+ mémoires fonctionnelles.

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Expérience : deux souris comparées, avec/sans CMHII (sans CMH II pas de CD4)).
- Première infection - les deux souris ont eu un nombre similaire de T cells CD8.
- 70 post infection : présence
même quantité de CD8 mémoires
- Deuxième ré-infection : peu de CD8 (sans CMHII) mémoire en raison de l’absence de CD4 - ne subissent pas d’expansion clonale suite à une réinfection avec la même bactérie.

Quels sont les signaux contrôlant la différenciation des effecteurs en SLEC et MPEC?

IL-12, IFN-gamma (signal inflammatoire) et IL-2 (cytokines) : plus leur concentration est forte plus elle promouvoit la prolifération de SLEC (effecteurs donc absence de CD127) et dimminution de MPEC (mémoires)

Comment l’inflammation et IL-2 contrôlent le choix de différenciation des effecteurs? Bcl-6, T-bet, Blimp-1 ⇒ facteur de transcription

¬ Beaucoup Inflammation : expression élevé de T-bet et faible de Eomes et Bcl-6

¬ Beaucoup IL-2 : Expression élevé de Blimp-1


¬ Peu Inflammation : Expression faible de T-bet et élevé de EOmos et Bcl-6

¬ Peu IL-2 : Expression faible de B limp-1

III. Méthodes expérimentales permettant le suivi de la réponse des Tcells in vivo

  • tétramères de molécules de CHM I liés au peptide antigènique, molécules au centre qui est un agent fluorescent (streptavidine), la liaison tétramères+ TCR implique le CD8 en comparaison avec l’unité de la molécule de CMH I seul
  • Transfert adoptif de lymphocytes T expriamnt un RCT dont la spécificité antigénique est connue
    L’utilisation d’un organisme receveur pour en faire le suivie (permis grace au différence allélique), plus spécifiquement, des CD45.2+ sont transférée vers la souris CD45.1+, ⇒ après 5 à 14 jours, cellules T effectrices de CD45.2 sont retrouvées dans l’organisme CD45.1)
  • Marquage intracellulaire pour la détection des cytokines
    BLocage des protein permettant l’accumualtion des cytokines dans RE (T cells activé) → fixé puis perméabilisé avec des détergents → Ac spécifiques - cytokines pénétrent dans la cellule
    → possiblité de l’analyser par cytométrie
    Principe qui permet l’identification des T cells spécifiques à l’antigène d’intérêt
  • Production de la cytokine IFN-gamma par les T cells CD8 effecteurs spécifiques pour l’Ag
    - meme princpe que le précédant